【奥尔特内切论文】厌氧真菌内切型-β-葡聚糖酶基因af1在大肠杆

时间:2015-01-10 16:58:31 作者:孟楠;金欣;夏黎明;

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【摘要】:厌氧真菌能够产生高比活力的纤维素酶,但由于对厌氧环境的生产条件要求严格,生长速度缓慢,并不适合规模生产。本研究将厌氧真菌内切型-β-葡聚糖酶基因af1与大肠杆菌表达载体pET-28a(+)连接,得到重组质粒pET-28a(+)-af1。以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主,重组质粒转化后获得重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET-28a(+)-af1。采用SDS-PAGE蛋白电泳对重组大肠杆菌的表达产物进行分析,在40kDa附近得到与目的基因af1表达蛋白理论值相当的明显条带。AF1酶蛋白的最适pH为6.0,最适温度为45°C。重组大肠杆菌的摇瓶产酶试验结果显示:诱导培养18h时,内切型-β-葡聚糖酶(CMC酶)活力可达410U/mL。该项研究工作为进一步构建内切型-β-葡聚糖酶高产菌株奠定了良好的基础。
【论文正文预览】:0前言纤维素是地球上分布最广、蕴藏量最丰富的可再生资源。而纤维素酶是一类能够将纤维素降解为葡萄糖的多组分酶系的总称,被认为是最有应用潜力的酶制剂之一。纤维素酶属于糖苷水解酶,传统上被分为3类组分:内切型-β-葡聚糖酶(endo-1,4-β-D-glucanase,EC3.2.1.4),即CMC酶;
【文章分类号】:Q786
【稿件关键词】:生物化工厌氧真菌内切型-β-葡聚糖酶重组大肠杆菌基因表达
【参考文献】:
【稿件标题】:【奥尔特内切论文】厌氧真菌内切型-β-葡聚糖酶基因af1在大肠杆菌中的表达
【作者单位】:浙江大学化学工程与生物工程学系;绍兴文理学院医学院;
【发表期刊期数】:《科技通报》2014年01期
【期刊简介】:《科技通报》由浙江省科学技术协会主办、《科技通报》编辑部编辑出版的含理、工、农、医等学科的自然学科综合类学术期刊。本刊目前为“全国中文核心期刊”、“中国科技核心期刊”,并被国内多家重要机构、网站和数据库收录。ISSN:1001-7119,CN:33-1079/N......更多科技通报杂志社(http://www.400qikan.com/qk/1166/)投稿信息
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