1细胞凋亡与系膜增生性肾病
肾小球系膜细胞(GlomerularMesangialCells，GMC)处于肾小球毛细血管小叶的中心部位，是肾小球内非常活跃的细胞，具有分泌细胞基质、产生细胞因子、吞噬和清除大分子物质及类似平滑肌细胞收缩的功能并参与了肾脏的很多生理病理过程，在肾小球疾病的发生发展过程中亦起着重要的作用。肾小球系膜细胞增殖是多种肾脏病的核心病理环节，对肾小球疾病的发生发展及预后起着重要的作用。在肾小球损伤的早期，大量的中性粒细胞和巨噬细胞浸润并很快消退。近球旁器和肾门区的系膜细胞迁移至系膜区急剧增生并分泌基质大量沉积，分泌前炎症细胞因子、调节肾血流量等导致炎症反应加重，肾小球的结构和功能丧失，最终硬化而进行性损害肾功能。如何抑制系膜细胞增殖、促进增生的系膜细胞消散多年来一直是学者的研究重点。1987年，Harrison发现增殖的肾小球内存在不同程度的细胞凋亡现象，凋亡小体在中性粒细胞浸润显著及系膜增殖严重的区域最为明显。提示通过“细胞凋亡”可以清除不需要的细胞。此后，人们对细胞凋亡在肾脏疾病中的作用进行了大量的研究，进一步发现细胞凋亡在肾小球肾炎、肾小管疾病以及继发性肾脏疾病等肾脏疾病发病机制中有重要作用，并且参与许多肾脏疾病的发展，包括移植肾排异、梗阻性肾病及肾囊肿等病变。如祝葆华等［5］将诱导系膜增生性肾炎模型成功的SD大鼠分为实验组和对照组，并对其分别进行肾小球内c-myc和Bcl-2表达的检测，结果显示实验组肾小球内c-myc和Bcl-2的表达均明显多于对照组(P＜0.01)，从而证明c-myc及Bcl-2的高表达参与了肾小球系膜增生的发病机理。龚红蕾等［6］采用免疫组化-SP法检测肾活检标本中Bcl-2蛋白的表达。结果显示Bcl-2蛋白在增生性肾炎26例中，着色强染21例(80.8%)，非增生性肾炎14例着色低染11例(78.6%)，正常肾组织10例中着色低染8例(80.0%)。说明了凋亡因子的高表达与增生性肾炎的发病有着密切的关系。
2中医药研究进展
系膜增生性肾病的临床表现多以水肿、少尿、血尿为主，辩病当属祖国医学“水肿”、“尿血”、“癃闭”的范畴。西医治疗则以糖皮质激素、免疫抑制剂及对症治疗为主，治疗效果存在不确定性同时毒副作用明显。中医方面多以健脾益肾、活血通络等法为主，并取得明显疗效。现代医学研究证实，系膜细胞凋亡及其相关调控因子的异常与系膜增生性肾病的发病、进展及预后密切相关。在疾病的修复过程中，细胞凋亡可有效的清除增殖的系膜细胞，使肾小球的结构和功能恢复正常，缓解肾小球硬化，从而维持机体内环境的稳定［7］。近年来，关于中医药对增殖系膜细胞凋亡影响的相关研究已有大量报道。如丁樱等［8］通过复制慢性系膜增生性肾炎大鼠模型，以不同剂量雷公藤多甙片给以干预，后期采用免疫组织化学及TUNEL检测技术观察系膜增生性肾炎肾组织中系膜细胞凋亡及其调控基因Bcl-2的表达情况。研究发现雷公藤多甙对大鼠体内肾组织系膜区系膜细胞的凋亡有明显的诱导作用，能明显下调Bcl-2基因的表达，促进肾小球增殖性病变消散。马行一等［9］用不同浓度的青蒿琥酯刺激脂多糖诱导增殖的大鼠肾小球系膜细胞，并从细胞的凋亡形态、凋亡率、凋亡调控基因三个方面进行了检测。研究发现青蒿琥酯对系膜细胞凋亡有明显诱导作用，呈一定剂量依赖性，并能明显地抑制脂多糖诱导上调的Bcl-2基因的表达，且高浓度组的抑制作用强于低浓度组。肖黎等［10］采用体内实验与体外实验相结合的方法，探讨肾必宁冲剂治疗系膜增生性肾病的机制，实验设空白对照、西药对照及中药高、中、低剂量组，后采集含药血清，采用肾小球系膜细胞培养方法进行体外实验研究，测定系膜细胞增殖指数，观察凋亡细胞核小体DNA的断裂现象，并检测其ICE和Bcl-2的变化。结果提示肾必宁冲剂可诱导系膜细胞凋亡，促进肾小球增殖性病变消散，并可能通过调控ICE和Bcl-2基因影响凋亡。刘丽等［11］将制备的大鼠肾炎灵含药血清作用与体外培养的大鼠肾小球系膜细胞上，并采用荧光倒置显微镜及流式细胞术对来探讨肾炎灵对大鼠系膜细胞凋亡的影响。结果显示喂服肾炎灵大鼠的血清可诱导部分系膜细胞发生凋亡，从而推断肾炎灵的作用机制可能与其诱导肾系膜细胞发生凋亡有关。任现志等［12］研究黄芪、水蛭、及其配方含药血清对大鼠肾小球系膜细胞生长周期、凋亡的影响。实验将制备的不同组含药血清作用于体外培养的大鼠肾小球系膜细胞上，并采用流式细胞仪检测MC的凋亡显微镜观察凋亡形态，结果发现各组含药血清均能使大量MC处于G0/G1期，亦均能提高大鼠MC凋亡率，对治疗系膜增生性肾小球肾炎有一定的临床意义。张红敏等［13］采用肾小球系膜细胞培养方法进行体外研究，探讨血尿停冲剂对肾小球系膜细胞凋亡及凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达的影响，采用MTT法测定系膜细胞增殖指数;TUNEL法定量观察凋亡细胞;流式细胞术检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达。结果显示加入血尿停冲剂(S-9)16h后，系膜细胞出现了典型的凋亡征象，凋亡率显著高于对照组(P＜0.01);同时血尿停各组Bax、Bcl-2表达亦明显高于对照组(P＜0.01或P＜0.05)。证实血尿停冲剂可能通过调控Bax和Bcl-2基因表达诱导系膜细胞凋亡，促进肾小球增殖性病变消散。阐明了其治疗系膜增生性肾病有效的作用机制，为临床利用该药治疗以系膜增生为核心病理环节的多种肾脏疾病提供实验理论依据。
3讨论
细胞凋亡及其相关调控基因的异常表达与系膜增生性肾病的发生、发展及预后密切相关。综上所述，在炎症修复的过程中，通过调节细胞凋亡机制及其相关因子的表达来及时有效的清除异常增生的肾小球系膜细胞，从而减轻肾小球损伤、维持自身细胞数恒定，因此促进增生的肾小球系膜细胞凋亡成为了一种新的治疗理念。然而，在肾小球炎症过程中细胞过度凋亡导致细胞减少，是肾小球硬化重要原因［14-15］。不适当的细胞凋亡将导致固有细胞的丧失及肾功能的恶化，因此如何控制凋亡的程度是我们面临的新课题，而且中医药在促进凋亡的同时对其它脏器、功能是否有不适当的影响也是待发现和解决的。随着技术的不断发展，研究的不断深入，相信在不久的将来这一系列问题都会得到一一解决。
作者：任惠娟 任现志 单位：南京中医药大学
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