2、促红细胞生成素多克隆抗体及酶标抗体的制备及纯化研究
摘要：目的以免疫亲和层析方法纯化重组人促红细胞生成素(rhEPO)并免疫新西兰家兔制备多克隆抗体,用辣根过氧化物酶标记抗体,为进一步建立ELISA检测体系做准备。方法购买rhEPO,用淋巴结内注射法制备多克隆抗体,EPO抗体与葡聚糖凝胶偶联,制成抗体亲和层析柱,以rhEPO作为抗原上样纯化。抗体先盐析粗提纯再过SPA亲和层析柱纯化。用高碘酸钠法制备酶标抗体。结果亲和层析纯化的抗原、抗体纯度较高,蛋白质含量测定分别为0.560、.41 mg/ml;酶结合率为0.578。结论免疫亲和层析法纯化rhEPO,制备的多克隆抗体及酶标记抗体的纯度好,可以满足下一步组建试剂盒的需求。
3、体外诱导人羊膜上皮细胞分化为神经样细胞
摘要：目的探讨人羊膜上皮细胞体外向神经样细胞诱导分化的条件。方法碱性成纤维细胞生长因子预诱导剂(bFGF),化学诱导剂全反式维甲酸(ATRA)、丁酸羟基茴香醚(BHA)作为诱导剂,并以不含诱导剂的无血清的MEM培养基作为对照,密切观察分化过程中细胞形态的变化,诱导至6 h、12 h、24 h时,利用免疫细胞化学方法检测神经元特异性标志物的表达情况。结果诱导分化12 h后的ATRA组大部分细胞呈现双极、多极和锥形的典型神经元细胞的形态,免疫细胞化学显示这些细胞表现为NSE染色阳性,而丁酸羟基茴香醚(BHA)组细胞形态没明显变化,两组都不表达神经胶质细胞标记物GFAP。结论 hAECs可以在体外诱导分化为神经元样细胞,全反式维甲(ATRA)诱导效果较丁酸羟基茴香醚(BHA)好。
4、丹参多酚酸盐对匹鲁卡品致痫大鼠BDNF表达的影响
摘要：目的探讨丹参多酚酸盐对匹鲁卡品致痫大鼠脑内神经元的损伤及BDNF表达的影响,探讨其抗痫的可能机制。方法采用匹鲁卡品诱发癫痫状态模型,随机分为丹参多酚酸盐干预组、盐水干预组和对照组,观察各组大鼠的行为学改变,用免疫组织化学法标记显示各组大鼠脑内海马BDNF的表达变化。结果在海马CA1区有BDNF阳性细胞表达,各组比较行t检验,差异有统计学意义(P<0.05)。结论丹参多酚酸盐可以明显降低急性癫痫痉挛性大鼠的发作等级和发作时间,可能通过BDNF的表达增高来发挥作用。
5、DWI和PWI在单侧大脑中动脉狭窄、闭塞中的应用
摘要：目的应用MR脑弥散成像(DWI)和灌注成像(PWI)技术,分析单侧大脑中动脉(middle cerebral artery,MCA)狭窄、闭塞患者脑组织血液动力学的变化,并判断缺血半暗带(ischemic penumbra IP)的存在。方法将73例单侧MCA狭窄、闭塞患者分成狭窄组和闭塞组,所有患者均行常规MRI、MRA、DWI及动态磁敏感对比增强(dynamic susceptibilitycontrast-enhanced,DSC)灌注成像扫描。比较ADC值及脑灌注结果,分析两组间二者的差异,并比较患侧DWI、PWI病灶面积差异。结果 39例MCA狭窄的患者中20例(51.28%)DWI为高信号,31例(79.72%)灌注异常;34例MCA闭塞的患者中21例(61.76%)DWI为高信号,33例(97.06%)灌注异常。两组患者,患侧ADC值与镜像对侧脑组织比较均有显著差异(P<0.05);MCA狭窄组患侧rMTTr、TTP值与闭塞组比较,有显著差异(P<0.05)。60例(82.19%)患侧PWI病灶面积大于DWI病灶面积。结论 DWI能发现新鲜梗塞灶,但两组患者患侧ADC值比较,无显著差异;PWI能够显示MCA狭窄或闭塞区脑组织血流动力学变化,但两组患者病灶区PWI异常改变无显著差异;只有两者联合应用才可以判定是否存在缺血半暗带,从而为临床准确诊断、及时治疗提供帮助。