【有机化学论文范文大全】拟南芥丝氨酸羟甲基转移酶(AtSHMT)的原核表达与酶活测定

时间：2017-06-05 04:16:57 作者：江晶晶；张春义；

本文作者：江晶晶；张春义；姜凌；成功正常投稿发表论文到《中国农业科技导报》2014年06期,引用请注明来源400期刊网！
【摘要】：从拟南芥叶片中克隆了定位于线粒体的拟南芥丝氨酸羟甲基转移酶基因(AtSHM1),将其插入到pET-26b(+)表达载体,并在大肠杆菌中成功表达。优化表达条件之后,获得可溶性AtSHMT蛋白。用亲和色谱法成功分离纯化该蛋白,计算得到该酶酶学常数Km和Kmax分别为121μmol和21.8μmol/L·min。利用该酶催化DL-3-苯基丝氨酸裂解的产物苯甲醛在279nm波长处有强烈吸收的性质,测定反应产物的吸光值,根据苯甲醛标准曲线测得AtSHMT酶活,由此建立了一种测定真核生物丝氨酸羟甲基转移酶酶活的一种简便、快速、安全的方法。
【论文正文预览】：丝氨酸羟甲基转移酶[1](serinehydroxymethyltransferase,SHMT,EC2.1.2.1)广泛存在于生物细胞内。原核生物SHMT蛋白大部分为同源二聚体蛋白,而存在于真核生物细胞内的SHMT蛋白则大部分为同源四聚体结构[2]。SHMT蛋白催化如下可逆反应:甘氨酸+N5,N10-亚甲基四氢叶酸L-丝氨酸
【文章分类号】：Q946.5
【稿件关键词】：丝氨酸羟甲基转移酶亲和色谱酶活测定
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【稿件标题】：【有机化学论文范文大全】拟南芥丝氨酸羟甲基转移酶(AtSHMT)的原核表达与酶活测定
【作者单位】：中国农业科学院生物技术研究所;
【发表期刊期数】：《中国农业科技导报》2014年06期
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