【细胞转染】LMP-1基因转染骨髓间充质干细胞的LIM矿化蛋白表达

时间:2015-02-19 16:12:33 作者:金夏生;王子江;向川

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【摘要】:背景:体外实验提示LMP-1基因可提高骨质疏松性骨髓间充质干细胞LMP-1蛋白的表达。目的:用含有LIM矿化蛋白1基因的反转录病毒载体(RV-LMP-1-GFP)转染骨质疏松性SD大鼠骨髓间充质干细胞,检测其对骨质疏松性骨髓间充质干细胞LIM矿化蛋白表达的影响。方法:随机取雌性SD大鼠12只,采用双侧卵巢切除法建立骨质疏松性大鼠模型,另取6只大鼠仅切除卵巢周围等量脂肪组织,保留卵巢为假手术组。喂养2个月后取双侧股骨、胫骨、肱骨分离培养其骨髓间充质干细胞。均取3代培养细胞随机分为去势组、LMP-1转染组(转染LMP-1基因)和假手术组。分别行RT-PCR及Western-Blot检测各组细胞LIM矿化蛋白1mRNA和蛋白的表达。结果与结论:培养出骨质疏松性SD大鼠骨髓间充质干细胞,转染后倒置荧光显微镜下可见绿色荧光表达;3组细胞均可在基因及蛋白水平表达LIM矿化蛋白1。与假手术组及去势组比较,LMP-1基因转染组的LIM-1mRNA和蛋白的表达均升高显著(P0.05),假手术组与去势组之间差异无显著性意义(P0.05)。成功实现重组RV-LMP-1-GFP基因在骨质疏松性SD大鼠骨髓间充质干细胞中mRNA和蛋白水平的表达,且LMP-1的表达水平显著提高。结果表明重组LMP-1基因成功导入骨质疏松性大鼠骨髓间充质干细胞基因组中,并使得LMP-1mRNA和蛋白的表达明显提高。
【论文正文预览】:0引言Introduction骨质疏松是骨量和骨质量的下降,从而导致骨微结构的破坏和材料特性的削弱,引起了骨脆性和骨折风险的增加,其原因是破骨细胞活性的增加和成骨细胞功能的不足。骨质疏松性骨折主要包括椎体、股骨近端、肱骨近端的骨折。股骨近端骨折的人数预计到了2030年将增加
【文章分类号】:R329.2
【稿件关键词】:干细胞间质干细胞逆转录病毒科骨质疏松骨髓干细胞骨髓间充质干细胞去势大鼠LIM矿化蛋白基因反转录病毒转染
【参考文献】:
【稿件标题】:【细胞转染】LMP-1基因转染骨髓间充质干细胞的LIM矿化蛋白表达
【作者单位】:山西医科大学第二医院骨科;山西医科大学第二医院骨关节科;
【发表期刊期数】:《中国组织工程研究》2014年23期
【期刊简介】:《中国组织工程研究》杂志是由中华人民共和国新闻出版总署、正式批准公开发行的优秀期刊,中国组织工程研究杂志具有正规的双刊号,其中国内统一刊号:CN21-1581/R,国际刊号:ISSN2095-4344。中国组织工程研究杂志社由中华人民共和国卫生部主管、主办,本刊为......更多中国组织工程研究杂志社(http://www.400qikan.com/qk/6322/)投稿信息
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